Come preparare soluzioni di ormoni vegetali per la coltura tissutale

introduzione

I regolatori di crescita delle piante sintetizzati dalle piante sono necessari per la loro crescita e sviluppo. Ma, indurre la stessa risposta all'interno di un laboratorio in condizioni artificiali, richiede l'aggiunta ai media di regolatori di crescita delle piante esogeni.

Oggi, diversi regolatori di crescita delle piante naturali e sintetici (PGR), ormoni vegetali, o fitormoni sono disponibili per l'uso in esperimenti di coltura tissutale. Ma come preparare una soluzione PGR è un problema o confusione più comune affrontato dai nostri culturisti!

Così, in questo articolo, abbiamo spiegato come preparare la soluzione madre dei regolatori di crescita delle piante e la soluzione madre di NaOH (solvente) necessaria per dissolvere l'ormone in polvere.

Come preparare una soluzione stock di PGR?

Per preparare la soluzione stock di eventuali regolatori di crescita delle piante seguire i passaggi indicati di seguito:

• Prendi 50 ml di tubo di falco per ogni ormone per il quale sei disposto a preparare il brodo.
• Etichetta correttamente ogni provetta con il nome dell'ormone.
• Per preparare la soluzione di lavoro dell'ormone della crescita vegetale da 1 mg/L, preparare 1g/L di soluzione con acqua.
• Nel video, stiamo misurando 0,05 grammi (50 mg) di forma in polvere dell'ormone per preparare una soluzione madre da 50 ml.
• Puoi usare una tazza e una spatola per misurare ciascun regolatore di crescita delle piante. Ma, dovresti cambiare la tazza e pulire o cambiare la spatola ogni volta che misuri un altro regolatore di crescita delle piante per evitare qualsiasi contaminazione incrociata delle tue soluzioni di riserva.

Nota:da un flacone da 100 grammi di regolatori di crescita delle piante di PCT, puoi preparare 100 litri di soluzione madre. Però, hai solo bisogno di 1 ml di soluzione madre per fare 1 litro di terreno. Così, complessivamente puoi preparare 100K litri di media per bottiglia.

• Il prossimo passo è dissolvere la forma in polvere del regolatore di crescita. Non si dissolverà direttamente in acqua, quindi hai bisogno di un solvente.
• Utilizzare NaOH come solvente per dissolvere la forma in polvere del regolatore di crescita.
• Utilizzando una micropipetta, misurare 1 ml di NaOH e aggiungerlo alla provetta Falcon da 50 ml contenente il regolatore di crescita in polvere. Mescolare correttamente e cambiare i puntali delle pipette prima di passare a miscelare i successivi regolatori di crescita per evitare qualsiasi contaminazione incrociata tra gli ormoni (se si sta preparando una soluzione madre di ormoni vegetali di più di un ormone).

Puoi anche usare il piccolo agitatore o agitare il tubo o il flacone per sciogliere l'ormone in polvere nel solvente.

Nota:la procedura per preparare NaOH 1M è riportata di seguito. Così, prendere 1 ml di NaOH dalla soluzione 1 M preparata per dissolvere i regolatori di crescita delle piante.

• Quindi aggiungere 49 ml (perché hai già aggiunto 1 ml di NaOH per sciogliere l'ormone in polvere) di acqua distillata usando una pipetta per ottenere 50 ml della soluzione madre dell'ormone.
• Quindi, è ora di sterilizzare la soluzione madre poiché non sono sterili. Dovresti sapere del tuo ormone se è resistente al calore o meno.
• Se l'ormone non è resistente al calore, allora, è necessario filtrare la soluzione con una siringa dopo che il supporto si è raffreddato ad almeno 60 gradi Celsius e se è resistente al calore, è possibile autoclavare la soluzione.
• Quindi la tua soluzione stock è pronta per l'uso per il tuo esperimento. Puoi diluirlo per portarlo alla concentrazione desiderata.

Come preparare una soluzione NaOH 1M?

L'idrossido di sodio (NaOH) viene utilizzato per aumentare il pH dei terreni di coltura o dissolvere la forma in polvere del regolatore di crescita.

• Per preparare la soluzione madre di NaOH sono necessari pellet di NaOH, una spatola, Beuta.
• Aggiungere 100 ml di acqua distillata nella beuta di Erlenmeyer usando la pipetta.
• Per ottenere una soluzione molare di NaOH è necessaria la formula:

Molarità =no. di moli di soluto / 1 litro

E, una mole di idrossido di sodio =40 grammi

Così, se vuoi preparare 1 M di soluzione di NaOH, occorrono 40 grammi di NaOH sciolti in 1L di soluzione.

Ma, qui stiamo preparando solo 100 ml della soluzione madre, quindi per quello, occorrono solo 4 grammi di NaOH sciolti in 100 ml di acqua.

• Misura 4 grammi di NaOH usando una spatola su una bilancia.
• Aggiungere i granuli di NaOH misurati in acqua e usando un agitatore renderlo una soluzione omogenea.
• Dopo che i granuli si sono sciolti, trasferire la soluzione nel flacone di conservazione.
• La tua soluzione di NaOH 1 molare è pronta per l'uso per i tuoi esperimenti.

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