introduzione

Il fascino fogliare, il modello di variegatura e tessitura delle foglie, e la sua tolleranza alla luce solare limitata rendono l'Alocasia una delle piante più popolari tra i giardinieri paesaggisti e i collezionisti di piante.

Alocasia comprende circa 100 specie ed è un genere morfologicamente diversificato della famiglia delle Arecaceae. I membri sono ampiamente utilizzati per diversi scopi. le sue foglie, radici, e gambo sono usati per scopi commestibili in alcuni luoghi, e la pianta Giant Taro ha molte proprietà medicinali tra cui antidiarroiche, antimicotico, e proprietà antinfiammatorie.

Le proprietà medicinali e la bellezza della pianta la rendono molto ricercata dalle persone. La domanda vertiginosa di queste piante nello spazio commerciale ha spinto gli scienziati a trovare un'alternativa migliore per soddisfare la domanda del mercato. E, gli strumenti di coltura tissutale si sono dimostrati eccellenti tecniche per soddisfare tutti gli scopi summenzionati.

Questo articolo presenta una descrizione del Alocasia generi e i suoi membri e inoltre, ti porterà alla coltura dei tessuti di questa pianta e alla sua procedura.

Informazioni sulla pianta

Alocasia è un genere con specie di piante da fiore perenni tuberose con foglie larghe e rizomi. Le piante in genere crescono alte 2-6 '.

Le foglie delle piante sono a lungo peduncolo, a forma di freccia a forma di cuore che sono decorati e adornati in modo colorato in diverse dimensioni, da 8" a 36" di lunghezza, a seconda della specie. Le piante sono comunemente chiamate orecchie di elefante per la somiglianza delle loro foglie con le grandi orecchie di elefante.

Sono originari delle foreste pluviali tropicali, siti di vegetazione secondaria, e lungo ruscelli o luoghi paludosi dall'India, Sud-est asiatico, e la Cina meridionale attraverso le isole del Pacifico meridionale (in particolare Filippine, Isole Caroline, e Indonesia) nell'Australia orientale.

Alocasia è stata l'apice della moda per i giardinieri, culturisti, e collezionisti di piante da oltre 150 anni. Queste piante vengono raccolte e vendute su larga scala per soddisfare la scala commerciale.

L'esistenza di diverse specie dei generi è stata minacciata a causa della continua raccolta e distruzione dell'habitat. La pressione di proteggere queste piante può essere alleviata utilizzando tecniche di micropropagazione in vitro.

Cultura dei tessuti di Alocasia

La coltura tissutale è stata uno strumento biotecnologico essenziale nei laboratori di piante grazie al suo grande potenziale per la propagazione di piante medicinali di alto valore, produzione di prodotti naturali di alta qualità, e produzione rapida e di massa di piante.

È la migliore alternativa per la produzione di metaboliti vegetali importanti dal punto di vista medico, rapida moltiplicazione di specie in via di estinzione o rare, produzione di piante indenni da malattie, e trasformazione pianta-genoma.

Molte aziende hanno utilizzato la tecnica di coltura della punta del germoglio per produrre molti cloni di aroidi privi di malattie dal 1974 (Hartman).

Qui, è stata trattata una procedura per la coltura tissutale di Alocasia longiloba utilizzando semi, che è tratto dallo studio di Abdulhafiz, F., Maometto, UN., Kayat, F., Zaccaria, S., Hamzah, Z., Reddy Pamuru, R., Hamza Z., Reduan, M.F.H. (2020). Micropropagazione di Alocasia longiloba Miq e proprietà antiossidanti comparate degli estratti etanolici della pianta coltivata in campo, Callo Propagato In Vitro e Derivato In Vitro. Impianti, 9(7), 816. doi:10.3390/piante9070816

Procedura

• Materiale vegetale e preparazione dei semi:
• Raccogli i frutti di A.longoliba e lavarli sotto l'acqua corrente, quindi sciacquarli con acqua distillata sterile per rimuovere completamente la polvere. Quindi, separare accuratamente i semi a mano e farli seccare a temperatura ambiente per due settimane.
• Test di vitalità del seme:

• Imbevere alcuni semi (100 o più) in acqua distillata sterile per 18 h a 25 ± 2 °C per ammorbidire il tegumento e attivare i sistemi enzimatici.
• Immergere i semi in una soluzione di tetrazolio all'1% (pH 7,0 ± 2) e incubare a 45 ° C per 6 ore al buio.
• Al termine del periodo di incubazione, lavare i semi con acqua distillata sterile e osservare al microscopio il cambiamento di colore. Quindi, calcolare la percentuale di vitalità come numero di embrioni colorati/totale n. di embrioni moltiplicati per 100.

• Sterilizzazione della superficie del seme:

• Lavare i semi secchi di A. longiloba sotto l'acqua corrente per 30 min.
• Sterilizzare in superficie i semi con una concentrazione del 40% di Clorox (ipoclorito di sodio 5,25%) con poche gocce di tween-20.
• Agitare i semi su un agitatore orbitale a 80 giri/min per 20 min.
• Lavare i semi sterilizzati con acqua distillata sterile per rimuovere una traccia di Clorox e quindi asciugare con un asciugamano sullo studio del filtro Whatman sterilizzato (90 mm).

• Trattamento pre-germinazione:

Per rompere la dormienza dei semi e massimizzare la germinazione dei semi, seguire la procedura per trattare i semi:

• Scarificare i semi con acido solforico al 30% (H2SO4) per 15 min e poi sciacquare in acqua distillata per 10 min per eliminare la traccia di soluzione acida.
• Sterilizzarli in superficie con Clorox al 40% per 20 minuti e poi lavarli con acqua distillata sterile tre volte ogni volta per 1 minuto.
• Coltivare i semi su un terreno costituito da terreno MS, integrato con 30 g L−1 di saccarosio, 2,78 g L-1 Gelrite senza fitoregolatore.
• Regolare il pH a 5,7 ± 0,2 prima di aggiungere l'agar e quindi autoclavare a 121 ° C a 103 kPa per 20 min.
• Incubare le colture a 25 ± 2 °C con un fotoperiodo di 16 ore fornito da luci fluorescenti bianche fredde.

• Induzione e moltiplicazione dei germogli in vitro:

• Utilizzare i semi coltivati ​​in vitro di quattro settimane in questa fase.
• Rimuovere il cotiledone, ipocotile, e la radice con attenzione.
• Inoculare la punta del germoglio di circa 2-3 cm nel mezzo MS integrato con citochinina 6-benzil amino purina (BAP), a 3 mg L-1.

• Per l'induzione del callo:

• Trattare i semi con acido solforico al 30% per 15 min seguito da sterilizzazione superficiale con Clorox al 40% per 20 min.
• Quindi lavare gli espianti con acqua distillata sterile per rimuovere la traccia di Clorox.
• Inoculare i semi disinfettati in modo asettico in un barattolo contenente circa 25 ml di mezzo (mezzo MS integrato con 3 mg di L-1 IAA) per l'induzione del callo.
• Incubare le colture a 25 ± 2 °C sotto una luce fluorescente fredda con un ciclo luce/buio di 16/8 h.

• Per il radicamento in vitro:

• Coltivare i germogli isolati (2–3 cm) da colture multiple di germogli in barattoli di vetro contenenti 20 mL di terreno MS integrato con acido indolo-3-acetico a 0,5 mg L-1, integrato con 30 g L-1 di saccarosio e 8 g L-1 agar con fotoperiodo chiaro/scuro di 16/8 h.

• Per acclimatazione:

• Dopo 4 settimane, estrarre con cura le piantine ben radicate (8–9 cm di altezza) dai recipienti di coltura e lavarle accuratamente con acqua corrente di rubinetto.
• Quindi, sciacquare le radici con acqua per rimuovere il mezzo agar.
• Conservare le piantine nella stanza di coltura con una temperatura di 25 ± 2 °C per 5 giorni prima di essere trasferite in serra.
• Dopo cinque giorni, piantare le piantine in un piccolo vaso di plastica di 20 × 15 cm contenente un terreno con una combinazione di terriccio e muschio di torba in rapporto 1:2.

Continua a guardare la tua pianta e registra la loro crescita e nota eventuali cambiamenti negativi per intraprendere azioni istantanee prima che le tue colture siano completamente rovinate.

E, se questo protocollo funziona per te, fatecelo sapere a [email protected].

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